November 30th, 2020

Неврологические проблемы во время COVID-19: обзор

Почти у трети госпитализированных пациентов с COVID-19 развиваются энцефалопатические симптомы. Они могут варьироваться от изменения сознания до делирия и судорог у некоторых. Пациенты с измененным психическим статусом госпитализируются в три раза дольше, и две трети не могут справляться с повседневными делами во время выписки [ 3 ]. Энцефалопатия чаще встречается у взрослых. Основные причины сложны. У людей со значительным заболеванием легких или поражением нескольких органов гипоксические или метаболические нарушения могут быть основными причинами энцефалопатии. Мозг также может быть уязвим для системных иммунных нарушений. У некоторых пациентов может развиться острая некротическая геморрагическая энцефалопатия, которая, как считается, опосредована цитокинами [ 4 , 5]; другие имеют интратекальный синтез антител. Также описан синдром высвобождения цитокинов, при котором у пациентов развиваются спутанность сознания, тремор, мозжечковая атаксия, поведенческие изменения, афазия, пирамидный синдром, кома, паралич черепных нервов, дизавтономия и центральный гипотиреоз. Эти пациенты отвечают на терапию кортикостероидами [ 6 , 7 ]. У некоторых других могут развиться широко распространенные микроцеребральные кровоизлияния [ 8 ].

Collapse )

Перекрестная нейтрал-ция антитела SCoV2 в функционально консервативный сайт опосредуется авидностью

Особенности

Рентгеновские и электромагнитные структуры перекрестно нейтрализующего антитела COVA1-16 с SARS-CoV-2 RBD

Связывание COVA1-16 с SARS-CoV-2 RBD определяется CDR H3

COVA1-16 связывается с высококонсервативным эпитопом не-RBS, но все еще конкурирует с ACE2

Авидность IgG - ключ к перекрестной нейтрализации COVA1-16.
Резюме
Большинство антител, выделенных от людей с коронавирусной болезнью 2019 (COVID-19), специфичны к коронавирусу 2 тяжелого острого респираторного синдрома (SARS-CoV-2). Однако COVA1-16 - относительно редкое антитело, которое также перекрестно нейтрализует SARS-CoV. Здесь мы определили кристаллическую структуру фрагмента антитела COVA1-16 (Fab) с рецептор-связывающим доменом SARS-CoV-2 (RBD) и реконструировали с помощью электронной микроскопии отрицательного окрашивания с тримером гликопротеина шипа, чтобы выяснить структурную основу его перекрестная реактивность. COVA1-16 связывает высококонсервативный эпитоп на RBD SARS-CoV-2, главным образом через длинную определяющую комплементарность область (CDR) H3, и конкурирует с рецептором ангиотензин-превращающего фермента 2 (ACE2) из-за стерических препятствий, а не эпитопа. перекрытие. COVA1-16 связывается с гибкой конформацией RBD на шипе и зависит от авидности антител для нейтрализации. Эти результаты, наряду со структурным и функциональным обоснованием сохранения эпитопа, дают представление о разработке более универсальных вакцин и методов лечения от SARS-подобных коронавирусов.
COVA1-16 ингибирует связывание ACE2 из-за стерических затруднений с его легкой цепью, а не за счет прямого взаимодействия с сайтом связывания рецептора
Активность нейтрализации COVA1-16 стимулируется бивалентным связыванием IgG
RBD может принимать верхние и нижние конформации тримера S (Ke et al., 2020; Wrapp et al., 2020b). Хотя рецептор ACE2 связывает RBD только в восходящей конформации (Ян и др., 2020), ранее охарактеризованное перекрестно нейтрализующее антитело S309 от человека, выздоравливающего от SARS-CoV и COVA2-15 от человека с SARS-CoV-2 (Брауэр и др., 2020) может связывать RBD в верхних и нижних конформациях (Пинто и др., 2020; Wrapp et al., 2020b). Однако, в отличие от S309, эпитоп COVA1-16 полностью скрыт, когда RBD находится в нисходящей конформации ( Рисунок 2 A), по аналогии с эпитопом CR3022 (Юань и др., 2020b). Даже в верхней конформации RBD на не связанном тримере SARS-CoV-2 S (Wrapp et al., 2020b), эпитоп COVA1-16 не будет полностью открыт ( Рисунок 2 A). Таким образом, мы провели nsEM-анализ COVA1-16 в комплексе с тримером SARS-CoV-2 S ( рис. 2 B). Трехмерные (3D) реконструкции показали, что COVA1-16 может связываться с рядом ориентаций RBD на S-белке в верхнем положении, что указывает на его вращательную гибкость ( рис. 2 C). COVA1-16 может связывать тример S сверху (т. Е. Перпендикулярно вершине тримера; рис. 2С , желтый, синий и розовый) или сбоку (т. Е. Более наклонно; рис. 2).С, коричневый). Подгонка модели кристаллической структуры COVA1-16-RBD на карту nsEM показала, что RBD на S-тримере более открыта вокруг вершины, когда COVA1-16 связывается, по сравнению с не связанными тримерами ( рисунки S2 B и S2C). Двухвалентное связывание COVA1-16 IgG между соседними тримерами S также оказалось правдоподобным ( рис. S2 D). Недавний анализ криоэлектронной томографии (крио-ЭТ) показал, что среднее расстояние между префузией S на вирусной поверхности составляет около 150 Å (Яо и др., 2020), что сопоставимо с расстоянием между кончиками двух фрагментов антител (Fab) на IgG (обычно около 100–150 Å, хотя наблюдались более длинные расстояния) (Кляйн и Бьоркман, 2010 г.). Действительно, COVA1-16 IgG гораздо более прочно, чем Fab, связывается с SARS-CoV-2 RBD со значениями константы диссоциации (K D ) 0,2 нМ и 46 нМ, соответственно ( рис. S3 A), что отражает двухвалентное связывание в анализе. формат. Аналогичным образом, COVA1-16 IgG более прочно, чем Fab, связывался с RBD SARS-CoV (K D 125 нМ против 405 нМ) ( рисунок S3 B). Более того, кажущееся сродство COVA1-16 IgG снизилось примерно до значения Fab, когда количество SARS-CoV-2 RBD, загруженного на биосенсор, было уменьшено, что подтверждает мнение о том, что COVA1-16 может связываться бивалентно в этом анализе посредством межспайкового перекрестного связывания. связывание ( Рисунок S3 C).
Также будет информативным сравнить количество, плотность и конформационные состояния белков S на вирионах SARS-CoV-2 и SARS-CoV. Наши результаты подтверждают важность двухвалентного связывания антител, нейтрализующих SARS-CoV-2, и особенно для перекрестной нейтрализации SARS-CoV. Такой вклад двухвалентного IgG (авидность) в нейтрализацию SARS-CoV-2 также был предложен в недавнем исследовании, в котором сравнивали связывание поликлональных IgG и Fab (Барнс и др., 2020). Кроме того, однодоменное антитело верблюда VHH-72 улучшало свою нейтрализующую активность по отношению к SARS-CoV-2 при экспрессии в виде двухвалентного слияния Fc (Wrapp et al., 2020a). Эти наблюдения аналогичны некоторым широко нейтрализующим антителам гриппа к сайту связывания рецептора гемагглютинина (НА), где двухвалентное связывание может увеличить авидность и широту нейтрализации

Collapse )

Мои твиты

  • Пн, 02:33: RT @A_Vit_: Во-первых, это красиво! В Минске каратель гнался за протестующим, но сначала "догнал" дерево, а потом с ноги догнали его самого…
  • Пн, 04:45: Ух ты, прям Монро! https://t.co/3B9kE2hdV7
  • Пн, 05:47: Неврологические проблемы во время COVID-19: обзор https://t.co/x9gSHYKenY
  • Пн, 06:14: Перекрестная нейтрал-ция антитела SCoV2 в функционально консервативный сайт опосредуется авидностью https://t.co/m40l1VpAa4